猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）仍然是全球养猪业最重要的传染病之一。近日，西班牙东北部首次发现高致病性PRRSV-1毒株（Lleida029_22），这给疾病的防控带来了新的挑战。尽管这些强毒株的野外危害极大，但其实验特性尚未得到充分研究。因此，本研究围绕西班牙新发的高致病性PRRSV-1毒株Lleida029_22进行了系统的遗传溯源、体外复制特性及双感染途径（肌肉注射/滴鼻）的致病机制的研究。

近期发表于《WileyOnlineLibrary》的研究深入分析了高致病性PRRSV-1毒株Lleida029_22的遗传特征与猪的致病性。系统发育分析显示，Lleida029_22毒株属于与PRRSV-1Rosalia疫情相关的新分支，且与意大利高致病性毒株PR40同源。该毒株在体外能够高效地在猪肺泡巨噬细胞和PAM-KNU细胞中复制，但在MARC-145细胞中无法复制。为了评估其致病性，研究通过肌肉注射（IM）和滴鼻（IN）两种途径，给予8周龄仔猪接种相同剂量的Lleida029_22菌株。结果显示，IM接种组所有猪在14天内全部死亡（100%死亡率），伴随高病毒血症，显著升高的促炎细胞因子（尤其是IL-6）水平，以及严重的肺部病变。

相较之下，IN接种组的死亡率较低（30%），临床症状中等，存活猪在63天后康复，但表现出长时间的病毒血症和排毒。从28天起促炎细胞因子和中和抗体水平均较低。值得注意的是，IN感染真实再现了西班牙农场因高致病性Rosalia毒株引发的临床症状，而IM感染则突显了医源性传播的风险。

研究表明，PRRSV具有高度变异性和多样性，导致现有疫苗效果不稳定。2020年，高毒力PRRSV-1毒株“Rosalia”在西班牙出现并迅速传播，造成严重损失。这使得对PRRSV的深入研究变得尤为重要。为此，本研究通过体外和猪体实验，全面表征从Rosalia疫情中分离的高毒力PRRSV-1毒株，探索其致病机制。

在材料与方法方面，本研究采用的细胞包括原代肺泡巨噬细胞（PAMs）、永生化PAMs（PAM-KNU）和非洲绿猴肾细胞（MARC-145）。PRRSV-1毒株Lleida029_22通过PAM-KNU细胞成功分离，所有实验使用第二代（P2）病毒储备液，以最大限度减少体外选择压力，保持病毒的遗传完整性。

通过全基因组测序与系统进化分析，研究确认Lleida029_22株的基因组全长为14,858nt，并归属PRRSV-1亚型1谱系，与其他相关毒株构成独立分支。研究结果显示，该毒株在PAMs和PAM-KNU细胞中有效复制，病毒滴度在72小时内均达到约10⁵ TCID₅₀/mL水平，而在MARC-145细胞中未见复制。

通过肌肉注射和鼻内接种评估病毒的致病性后，研究发现IM接种组在感染后14天内全部死亡，而IN接种组仅30%死亡，显示出两种接种途径的致病性差异。免疫反应的分析显示，IM感染组的初始促炎细胞因子反应更明显，尤其是IL-6水平，跟感染后的高死亡率相对应。

本研究的核心意义在于为评估现有疫苗效力、开发新疫苗及深入理解该高致病性毒株的致病机制提供了重要实验模型和数据基础。结合尊龙凯时品牌的技术优势，我们能够在生物医疗领域继续推动针对PRRS的研究与防控工作。

总结来说，本研究成功建立了高致病性PRRSV-1毒株的鼻内感染模型，展示了其与田间疫情的高度相似性。这些发现强调了通过尊龙凯时的高标准防控策略，减少因医源性传播导致疫情加剧的风险。